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T7 Endonuclease I

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EN303-01/02
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T7 Endonuclease I

T7 核酸内切酶I

高检测灵敏度高

产物可直接电泳检测

T7 Endonuclease I 是克隆重组T7 Endonuclease I基因后在大肠杆菌中表达纯化的高活性蛋白,能识别并切割不完全配对DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或DNA 分叉点、异源双链DNA 及低速切割带切刻位点的双链DNA。酶切位点为错配5’ 端的第一、第二或第三个磷酸二酯键。

组分

EN303-01(250 U)

EN303-02(1,250 U)

T7 Endonuclease I

25 μl

125 μl

T7 Endonuclease I Reaction Buffer(10 x )

1 ml

1 ml

Control template

10 μl

20 μl

-20℃保存

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:做基因编辑,酶切验证编辑成功,但是测序结果却不正确(假阳性)。

A1:编辑完成之后,提取基因组,做PCR扩增目的片段,利用T7核酸内切酶进行验证,有目的条带,连T载做转化,菌检测序。建议在菌检结束之后,利用菌检产物再做一次酶切验证是否将有效片段连入载体,如果酶切验证是阳性的,则可以测序。

Q2:该实验反应温度的上限是多少?

A2: 反应温度超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。避免反应温度超过55℃,否则会导致酶活性降低。

Zhao Q, Wang M, Xu D, et al. (2015). Metabolic coupling of two small-molecule thiols programs the biosynthesis of lincomycin A. Nature, 518(7537):115-119.IF:42.351
Ma Z, Zhu L, Song T,et al. (2017). A paralogous decoy protects Phytophthora sojaeapo plastic effector PsXEG1 from a host inhibitor. Science,355(6326):710-714. IF: 34.66
Wu H, Yin QF, Luo Z, et al. (2016). Unusual Processing Generates SPA LncRNAs that Sequester Multiple RNA Binding Proteins. Molecular Cell, 64(3), 534-548.IF:13.958
Tian Z, Sun P, Yan Y, et al. (2015). An enzymatic [4+2] cyclization cascade creates the pentacyclic core of pyrroindomycins. Nature chemical biology,11:259-265. IF: 13.217
Wang M, Zhao Q, Zhang Q, et al. (2016). Differences in PLP-Dependent Cysteinyl Processing Lead to Diverse S-Functionalization of Lincosamide Antibiotics. J Am ChemSoc, 138(20), 6348-6351.  IF: 13.038
Lv M, Ji X, Zhao, J, et al. (2016). Characterization of a C3 Deoxygenation Pathway Reveals a Key Branch Point in Aminoglycoside Biosynthesis. J Am ChemSoc, 138(20), 6427-6435.IF: 13
Chen T, Xiang JF, Zhu S, et al. (2015). ADAR1 is required for differentiation and neural induction by regulating microRNA processing in a catalyticallyindependent manner. Cell Res, 25(4):459-476. IF: 12.413
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Yuan H, Zhang J, Cai Y, et al. GyrI-like proteins catalyze cyclopropanoid hydrolysis to confer cellular protection[J]. Nature Communications, 2017, 8(1).IF:12.124
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Xu DC, Shan B, Sun HW, et al. (2016). USP14 regulates autophagy by suppressingK63 ubiquitination of Beclin 1. Genes Dev., 30, 1-14. IF: 10.042
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EN301-01/02
货  号
TR101-01/02
货  号
TR102-01/02
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